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本周hzangs在最新文獻中選取了12篇分享給大家，第1篇文章介紹了人子宮基質細胞來源細胞外囊泡對妊娠過程的影響；第2篇文章介紹了腫瘤來源外泌體miR-3591-3p誘導M2細胞並促進腫瘤進展；第3篇文章提出了一種用於單細胞外囊泡檢測分析的策略；第5篇文章介紹了使用細胞外囊泡亞群作為新冠病毒誘捕劑的策略；第8篇文章介紹了人亨廷頓病人隊列來源細胞外囊泡的特徵；第10篇文章綜述了細胞外囊泡在再生醫學方面的研究進展。

1.Extracellular vesicles secreted by human uterine stromal cells regulate decidualization, angiogenesis, and trophoblast differentiation.

人子宮基質細胞分泌的細胞外囊泡調節蛻膜化、血管生成和滋養層分化。

[Proc Natl Acad Sci U S A] PMID: 36095212

摘要：在人類中，子宮在妊娠早期經歷了劇烈的轉變，形成子宮內膜基質衍生的分泌組織，稱為蛻膜。蛻膜分泌各種以自分泌/旁分泌方式起作用的因子，以促進基質分化，促進母體血管生成，並影響滋養層的分化和發育，這對於功能性胎盤的形成至關重要。在這裏，韦德国际研究了蛻膜細胞相互研讨以及與子宮環境中其他細胞類型研讨的機制。韦德国际發現原代人子宮內膜基質細胞 (HESCs) 在蛻膜化過程中分泌細胞外囊泡 (EVs)，並且這一過程受保守的 HIF2α-RAB27B 通路控制。質譜分析顯示，蛻膜 EV 含有多種蛋白質貨物，包括細胞信號分子、生長調節劑、代謝調節劑以及控制內皮細胞擴張和重塑的因素。韦德国际檢驗了蛻膜細胞分泌的 EV 介導子宮內各種細胞類型之間的功能通訊的假設。韦德国际證明了 EV 的內化，特別是那些攜帶葡萄糖轉運蛋白 1 (GLUT1) 的 EV，促進了受體 HESC 中的葡萄糖攝取，支持和推進了蛻膜化計劃。此外，將 HESC 衍生的 EV 輸送到人內皮細胞中刺激了它們的增殖並導致血管網絡形成增強。引人注目的是，基質 EV 還促進了滋養層幹細胞向絨毛外滋養層譜系的分化。總的來說，這些發現给予了對蛻膜細胞分泌的 EV 所發揮的多效性作用的更深入理解，以確保在蛻膜和胎盤形成的進行階段，子宮內膜分化和血管生成與滋養層功能的協調。

2.Tumor-derived exosomes deliver the tumor suppressor miR-3591-3p to induce M2 macrophage polarization and promote glioma progression.

腫瘤衍生的外泌體傳遞腫瘤抑制因子 miR-3591-3p 以誘導 M2 巨噬細胞極化並促進膠質瘤進展。

[Oncogene] PMID: 36085418

摘要：外泌體可以選擇性地從細胞中分泌有害代謝物質以維持細胞穩態，並且外泌體與膠質瘤免疫微環境中的腫瘤相關巨噬細胞（TAM）之間會發生複雜的串擾。然而，這些外泌體包裹的貨物產生免疫抑制微環境的確切機制仍不清楚。在這裏，韦德国际研究了膠質瘤衍生的外泌體 (GDE) 對巨噬細胞極化和膠質瘤進展的影響。韦德国际對膠質瘤患者的腦脊液 (CSF) 和腫瘤組織進行了測序分析，以鑑定功能性 microRNA (miRNA)。在 CSF 和 GDE 中發現了高水平的 miR-3591-3p，但在正常腦組織或神經膠質細胞中沒有發現。在功能上，GDEs 和 miR-3591-3p 顯着誘導 M2 巨噬細胞極化並增加 IL10 和 TGFβ1 的分泌，進而促進膠質瘤的侵襲和遷移。此外，膠質瘤細胞系中的 miR-3591-3p 過表達導致 G2/M 期阻滯並顯着增加細胞凋亡。機制上，miR-3591-3p 可以分別直接靶向巨噬細胞和膠質瘤細胞中的 CBLB 和 MAPK1，並進一步激活 JAK2/PI3K/AKT/mTOR、JAK2/STAT3 和 MAPK 信號通路。體內實驗證實，用 miR-3591-3p 慢病毒轉導的巨噬細胞可以顯着促進膠質瘤進展。因此，韦德国际的研究表明，膠質瘤細胞中的腫瘤抑制性 miR-3591-3p 可以顺利获得外泌體分泌並靶向 TAM 以誘導免疫抑制微環境的形成。總的來說，這些發現為膠質瘤外泌體 miRNA 在介導免疫抑制性腫瘤微環境的建立中的作用给予了新的見解，並表明 miR-3591-3p 可能是一種有價值的生物標誌物，並且阻斷 miR-3591-3p 封裝到外泌體中可能成為一種新型的膠質瘤免疫治療策略。

3.An immunogold single extracellular vesicular RNA and protein (Au SERP) biochip to predict responses to immunotherapy in non-small cell lung cancer patients.

一種免疫金單細胞外囊泡 RNA 和蛋白質 (Au SERP) 生物晶片，用於預測非小細胞肺癌患者對免疫治療的反應。

[J Extracell Vesicles] PMID: 36093740

摘要：傳統的 PD-L1 免疫組織化學組織活檢僅預測 20%-40% 的非小細胞肺癌 (NSCLC) 患者將對抗 PD-1/PD-L1 免疫療法產生持续反應。在這裏，韦德国际提出了一種免疫金生物晶片來量化單個細胞外囊泡 RNA 和蛋白質 (Au SERP) 作為非侵入性替代方案。僅用 20 微升純化血清，以單囊泡解像度檢測到細胞外囊泡 (EV) 和 EV PD-1/PD-L1 信使 RNA (mRNA) 貨物表面的 PD-1/PD-L1 蛋白並且超過了它們的批量分析常規對應物 ELISA 和 qRT-PCR 的靈敏度 1000 倍。顺利获得測試一組 27 名無反應和 27 名有反應的 NSCLC 患者，Au SERP 表明單 EV mRNA 生物標誌物在預測患者對免疫治療的反應方面超過了單 EV 蛋白生物標誌物。雙單EV PD-1/PD-L1 mRNA檢測區分有反應者和無反應者的準確率為72.2%，NSCLC診斷準確率為93.2%，這表明Au SERP有潛力给予增強的免疫治療預測和癌症診斷臨床環境。

4.Large extracellular vesicles secreted by human iPSC-derived MSCs ameliorate tendinopathy via regulating macrophage heterogeneity.

人 iPSC 衍生的 MSC 分泌的大細胞外囊泡顺利获得調節巨噬細胞異質性來改善肌腱病變。

[Bioact Mater] PMID: 36101856

摘要：肌腱病是一種常見的肌肉骨骼疾病，會導致慢性疼痛和性能下降。近年來，幹細胞衍生的小細胞外囊泡（sEVs）對肌腱病的治療效果得到了驗證。然而，作為細胞外囊泡的另一個子集的大細胞外囊泡（lEVs）是否具有改善肌腱病變的能力仍然未知。在這裏，韦德国际發現從 iPSC 衍生的 MSC (iMSC-lEVs) 分泌的 lEV 顯着減輕了大鼠肌腱病變引起的疼痛。免疫組織化學分析表明，iMSC-lEVs 調節大鼠腱組織中浸潤的巨噬細胞和幾種炎性細胞因子的異質性。同時，體外實驗表明，M1促炎巨噬細胞被iMSC-lEVs重新極化為M2抗炎巨噬細胞，這種作用是顺利获得調節p38 MAPK通路介導的。此外，液相色譜-串聯質譜分析鑑定了 2208 種包裹在 iMSC-lEV 中的蛋白質，其中包括 134 種超出當前 Vesiclepedia 數據庫的新發現蛋白質。顺利获得生物信息學和蛋白質印跡分析，韦德国际發現 DUSP2 和 DUSP3（p38 磷酸化的負調節因子）在 iMSC-lEV 中富集，並且可以轉運至巨噬細胞。此外，iMSC-lEVs 對巨噬細胞的免疫調節作用在肌腱病患者的外植體肌腱組織中得到驗證。總之，韦德国际的研究結果表明，iMSC-lEVs 可以顺利获得調節巨噬細胞異質性來減少肌腱病中的炎症，這種異質性是顺利获得 p38 MAPK 途徑顺利获得遞送 DUSP2 和 DUSP3 介導的，並且可能是肌腱病治療的有希望的候選者。

5.ACE2-containing defensosomes serve as decoys to inhibit SARS-CoV-2 infection.

含有 ACE2 的防禦體可作為誘餌來抑制 SARS-CoV-2 感染。

[PLoS Biol] PMID: 36099266

摘要：內體來源的細胞外囊泡、外泌體顺利获得運輸具有與組織穩態和疾病相關的多種功能的底物來介導細胞間通訊。它們的診斷和治療潛力已被認可用於信號缺陷突出的癌症等疾病。然而，现在尚不清楚外泌體及其貨物在多大程度上告知傳染病的進展。韦德国际最近定義了一個稱為防禦體的外泌體子集，它們在細菌感染期間以依賴自噬蛋白的方式動員。顺利获得在其表面摻入蛋白質受體，防禦體顺利获得結合和抑制細菌病原體分泌的成孔毒素來介導宿主防禦。鑒於這種作為誘餌干擾表面蛋白相互作用的能力，韦德国际研究了防禦體在感染 2019冠狀病毒病 (COVID-19) 的病原體嚴重急性呼吸綜合徵冠狀病毒 2 (SARS-CoV-2) 期間的作用。與保護功能一致，來自重症 COVID-19 患者的支氣管肺泡灌洗液 (BALF) 中含有高水平病毒受體 ACE2 的外泌體與重症監護病房 (ICU) 和住院時間減少有關。韦德国际發現 ACE2+ 外泌體是由 SARS-CoV-2 感染和細胞培養物中病毒傳感器的激活誘導的，這需要自噬蛋白 ATG16L1，將這些定義為防禦體。韦德国际進一步證明 ACE2+ 防禦體直接結合併阻止病毒進入。這些發現表明，防禦體可能有助於對抗 SARS-CoV-2 的抗病毒反應，並擴大韦德国际對感染過程中細胞外囊泡的調節和影響的認識。

6.Extracellular Vesicles Regulate Sympatho-Excitation by Nrf2 in Heart Failure.

細胞外囊泡顺利获得 Nrf2 在心力衰竭中調節交感神經興奮。

[Circ Res] PMID: 36098045

摘要：慢性心力衰竭 (CHF) 與氧化還原失衡有關。Nrf2（核因子樣2）的下調在 CHF 的情況下在破壞心肌氧化還原止血和介導交感神經活動中起重要作用。然而，尚不清楚循環細胞外囊泡 (EV) 是否顺利获得破壞中樞氧化還原穩態而引起 CHF 的交感神經興奮。韦德国际檢驗了心臟衍生的 EV 循環到前交感神經延髓腹外側並顺利获得富含 EV 的 microRNA 介導的 Nrf2 下調促進氧化應激和交感神經興奮的假設。收集心肌梗塞 (MI) 後患有 CHF 的大鼠和患有缺血性 CHF 的人類受試者的數據。EVs 從組織和血漿中分離出來，韦德国际確定了與靶向 Nrf2 翻譯相關的 miRNAs 貨物。韦德国际使用體外標記的循環 EV 和心臟特異性膜 GFP + 轉基因小鼠跟蹤心臟衍生 EV 的分佈。最後，韦德国际測試了外源性負載對特定 Nrf2 相關 miRNA 的拮抗劑對正常大鼠 CHF-EV 誘導的病理生理表型（例如，交感神經和心臟功能）的影響。CHF 大鼠的 Nrf2 下調與 Nrf2 靶向 miRNA 的上調有關，這些 miRNA 在大鼠和人類的心臟衍生和循環 EV 中含量豐富。從 CHF 大鼠腦中分離的 EV 也富含 Nrf2 靶向 miRNA 和心臟特異性 miRNA。心臟來源的 EV 被延髓腹外側的神經元吸收。與假手術大鼠相比，將來自 CHF 大鼠的心臟衍生和循環 EV 注入正常大鼠延髓頭端腹外側，引起腎交感神經活性和血漿去甲腎上腺素的增加，顺利获得外源性預加載 CHF-EV 與拮抗劑可減弱這些活性。

7.Atractylenolide I ameliorates cancer cachexia through inhibiting biogenesis of IL-6 and tumour-derived extracellular vesicles.

白朮內酯 I 顺利获得抑制 IL-6 和腫瘤來源的細胞外囊泡的生物合成來改善癌症惡病質。

[J Cachexia Sarcopenia Muscle] PMID: 36085573

摘要：Atractylenolide I (AI) 是從白朮中分離得到的天然倍半萜內酯。已發現 AI 可改善臨床癌症患者和荷瘤小鼠的癌症惡病質。在這裏，韦德国际檢查了 AI 對癌症惡病質小鼠 IL-6 和細胞外囊泡 (EVs) 生物合成的影響，然後重點研究 AI 在抑制腫瘤衍生 EVs 產生方面的機制。將 C26 荷瘤 BALB/c 小鼠用作動物模型，以檢查 AI (25 mg/kg) 在減輕惡病質症狀、血清 IL-6 和 EVs 水平方面的作用。在體外進一步觀察了用 AI (0.31-5μM) 處理的 C26 腫瘤細胞的 IL-6 和 EVs 分泌。體外培養的C2C12肌管和3T3-L1成熟脂肪細胞用於檢查用AI（0.625-5μM）處理的C26細胞的條件培養基誘導肌肉萎縮和脂肪分解的效力。顺利获得使用 Seahorse XFe96 Analyser 測量細胞外酸化率來評估 C26 細胞在 AI (0.31-5|M) 處理下的糖酵解效力。使用蛋白質印跡檢查體外和體內實驗中相關信號蛋白的水平以研究可能的機制。STAT3 過表達或敲除 C26 細胞也用於確認 AI (5|M) 的作用。AI改善了癌症惡病質症狀（P<0.05），提高了握力（P<0.05）並降低了C26腫瘤的血清EV（P<0.05）和IL-6（P<0.05）水平。AI 直接抑制培養的 C26 細胞的 EV 生物發生 (P<0.001) 和 IL-6 分泌 (P<0.01)。當用 AI 處理 C26 細胞時，C26 培養基誘導 C2C12 肌管萎縮（+59.54%，P<0.001）和 3T3-L1 脂肪細胞脂解（+20.73%，P<0.05）的效力顯着減弱。AI 處理抑制了 C26 細胞中的有氧糖酵解和 STAT3/PKM2/SNAP23 通路。此外，STAT3 的過表達部分拮抗 AI 在抑制 STAT3/PKM2/SNAP23 通路、EV 分泌、糖酵解和 C26 培養基誘導肌肉萎縮和脂肪分解中的效力，而 STAT3 的敲除增強了 AI 對這些值的抑制作用.在 C26 腫瘤組織中也觀察到 AI 對 STAT3/PKM2/SNAP23 通路的抑制作用。AI 顺利获得減少腫瘤細胞的 IL-6 和 EV 的產生來改善癌症惡病質。AI 對 EV 生物合成的降低作用是基於其對 STAT3/PKM2/SNAP23 通路的抑制。

8.Abnormal molecular signatures of inflammation, energy metabolism, and vesicle biology in human Huntington disease peripheral tissues.

人類亨廷頓病外周組織中炎症、能量代謝和囊泡生物學的異常分子特徵。

[Genome Biol] PMID: 36071529

摘要：神經退行性疾病的一個主要挑戰涉及識別跟蹤疾病進展或響應干預的生物疾病特徵。亨廷頓病 (HD) 是一種遺傳性神經退行性疾病，现在正在進行幾項臨床試驗。因此，韦德国际檢查外周組織是否可以作為 HD 患者 RNA 和蛋白質水平上易於取得的生物特徵的來源。韦德国际從骨骼肌、皮膚和脂肪組織中生成大型、高質量的人類數據集，以探測人類表現前和早期表現 HD 患者的分子變化——這些患者最有可能參與臨床試驗。轉錄組學和蛋白質組學數據的分析顯示了穩健的、階段依賴性的失調。基因本體分析證實炎症和能量代謝參與外周 HD 發病機制。此外，韦德国际觀察到細胞外囊泡穩態的變化，韦德国际發現參與這一過程的基因和蛋白質發生了一致的變化。韦德国际的組學數據記錄了炎症、能量代謝和細胞外囊泡穩態的參與。這證明了從 HD 中的外周組織中識別出適合作為臨床試驗生物標誌物的生物特徵的潛力。生成的數據，輔以從外周組織建立的原代細胞系，以及可用作人類 HD 模型的大量 iPSC 系，是推進當前對驅動 HD 發病機制的分子機制的理解的寶貴且獨特的資源。

9.Eliciting anti-cancer immunity by genetically engineered multifunctional exosomes.

顺利获得基因工程多功能外泌體引發抗癌免疫。

[Mol Ther] PMID: 35746867

摘要：外泌體是參與調節細胞間通訊的細胞衍生納米囊泡。與傳統的納米藥物相比，外泌體具有治療開發的獨特優勢。儘管它們在藥物遞送方面取得了重大成功，但外泌體在免疫治療中的全部潛力仍未開發。在這裏，韦德国际設計了具有表面展示抗體靶向基團和免疫調節蛋白的基因工程外泌體。顺利获得與外泌體膜蛋白的基因融合，Expi293F 細胞衍生的外泌體配備了特異於人類 T 細胞 CD3 和表皮生長因子受體 (EGFR) 的單克隆抗體以及免疫檢查點調節劑、程序性死亡 1 (PD-1) 和 OX40配體（OX40L）。由此產生的基因工程多功能免疫調節外泌體 (GEMINI-Exos) 不僅可以重定向和激活 T 細胞以殺死 EGFR 陽性三陰性乳腺癌 (TNBC) 細胞，還可以引發強大的抗癌免疫，從而高效抑制 TNBC 腫瘤。GEMINI-Exos 代表了免疫治療的候選藥物，並可能為產生具有所需功能和特性的基於外泌體的免疫治療劑给予一般策略。

10.Functional Extracellular Vesicles for Regenerative Medicine.

用於再生醫學的功能性細胞外囊泡。

[Small] PMID: 35322545

摘要：細胞外囊泡 (EVs) 獨特的生物學特性和有前景的臨床潛力激發了 EV 在再生醫學中的應用。作為細胞間通訊的重要介質，自然分泌的 EV 具有作為先天生物治療劑的潛力，可促進組織再生。儘管 EV 已作為新型治療劑出現，但與臨床過渡相關的挑戰已導致進一步的功能化。近年來，已經開發出各種工程方法，例如預處理、載藥和表面改性，以增強 EV 的治療效果。此外，天然 EV 的局限性已顺利获得開發人工 EV 得到解決，這些人工 EV 在產量和分離純化方法方面具有優勢。在這篇綜述中，對天然 EV 的功能化和人工 EV 的最新進展，特別是在再生醫學領域的最新進展给予了當前技術的最新概述。

11.Photoactivatable Silencing Extracellular Vesicle (PASEV) Sensitizes Cancer Immunotherapy.

光激活沉默細胞外囊泡 (PASEV) 可提高癌症免疫療法的敏感性。

[Adv Mater] PMID: 35793475

摘要：免疫療法在對抗腫瘤惡性腫瘤方面取得了令人矚目的成果。然而，腫瘤微環境（TME）內的免疫浸潤不足和免疫原性差極大地影響了患者的反應率。在這裏，開發了一種用於致敏癌症免疫治療的光激活沉默細胞外囊泡 (PASEV)。p21 活化激酶 4 (PAK4) 是一種新發現的與免疫排斥相關的腫瘤細胞內在「守衛」。針對 PAK4 的小干擾 RNA (siPAK4) 設計並與可光活化的活性氧 (ROS) 敏感聚合物組裝在一起，以形成納米複合物核心，該核心被來自 M1 巨噬細胞的細胞外囊泡進一步偽裝。PASEV 不僅可作為 siPAK4 的包裝、腫瘤積累和 ROS 響應釋放的載體，以有效地沉默 PAK4，而且還顺利获得免疫原性光療啟動 TME，從而同時促進腫瘤內浸潤和免疫激活。聯合免疫療法可引發強大的抗癌免疫，從而顯示出對抗癌症的巨大希望。這項工作為同時促進致敏癌症免疫治療的腫瘤內浸潤和免疫激活開闢了一條新途徑。

12.Trem2 deletion enhances tau dispersion and pathology through microglia exosomes.

Trem2 缺失顺利获得小膠質細胞外泌體增強 tau 分散和病理學。

[Mol Neurodegener] PMID: 36056435

摘要：阿爾茨海默病 (AD) 是一種神經退行性疾病，表現為具有年齡依賴性發病的Aβ 和 tau 腦病理學。小膠質細胞免疫受體 TREM2 的變異與散發性阿爾茨海默病 (AD) 的發病風險增加有關。雖然最近的研究表明 TREM2 功能障礙會加重 tau 病理，但 TREM2 依賴性調節 tau 病理的機制仍然難以捉摸。在這裏，韦德国际顺利获得將 AAV-P301L tau 注射到 MEC 中來描述野生型 (WT) 和 Trem2 敲除 (KO) 小鼠從內側內嗅皮層 (MEC) 擴散到海馬的漸進性 tau 的差異，以及海馬 tau 組織病理學的相關變化具有空間和恐懼記憶。韦德国际還使用微流體分散測定比較了培養的小膠質細胞和神經元之間神經元內分散的影響，分析了攝取後小膠質細胞 tau 運輸的差異，並量化了純化的 WT 和 Trem2 KO 外泌體 tau 分泌和致病性。小鼠中的 Trem2 缺失 (Trem2 KO) 可以增強 tau 從內側內嗅皮層 (MEC) 向海馬的擴散，這與突觸功能和記憶行為受損相吻合。小膠質細胞中的 Trem2 缺失增強了 tau 在微流體室中培養的神經元層之間的體外神經元分散，並且外泌體抑制劑的存在可以顯着減少來自負載 tau 的小膠質細胞的外泌體和細胞外介質中的 tau。儘管小膠質細胞 Trem2 缺失對 tau 攝取沒有影響，但 Trem2 缺失增強了內化後內體和細胞前外泌體區室的分佈。Trem2 缺失對外泌體大小几乎沒有影響，然而，蛋白質組學分析表明，Trem2 缺失可以顺利获得與外泌體誘導相關的 tau 和 LPS/ATP 處理條件調節小膠質細胞蛋白質組學景觀的變化。此外，與來自 WT 小膠質細胞的外泌體相比，來自 Trem2 KO 小膠質細胞的外泌體顯示出升高的 tau 水平，並且在 tau FRET 報告基因系中具有增強的 tau 播種能力。總之，韦德国际的結果揭示了 Trem2 在抑制外泌體 tau 致病性中的作用，並證明 Trem2 缺失可以增強 tau 顺利获得小膠質細胞外泌體的運輸、分佈和播種。

【韦德国际生物】

北京韦德国际生物科技有限公司由清華大學醫學院杜亞楠教授科研團隊領銜創建，清華大學參股共建。核心技術源於清華大學的科技成果轉化。公司專注於打造原創3D細胞「智造」平台，给予基於3D微載體的細胞規模化定製化擴增工藝整體解決方案。

韦德国际生物核心產品3D TableTrix®微載片（微載體），是自主創新型、首款可用於細胞藥物開發的藥用輔料級微載體。已顺利获得中檢院等相關權威组织的檢驗報告，並取得2項國家藥監局藥用輔料資質（CDE審批登記號：F20210000003、F20200000496）。同時，產品取得美國FDA DMF藥用輔料資質（DMF：35481）。

韦德国际生物的產品與服務，可廣泛應用於基因與細胞治療、細胞外囊泡、疫苗及蛋白產品等生產的上游工藝開發。同時，在再生醫學、類器官與食品科技（細胞培養肉等）領域也具有廣泛應用前景。

公司擁有5000餘平米的研發與轉化平台，其中包括1000餘平的以3D細胞智造及微組織再生醫學治療產品為核心的CDMO服務平台；還擁有4000平米的GMP生產平台，並新建1200L微載體生產線。相關技術已取得100餘項專利成果，30餘篇國際期刊報道。核心技術項目已取得多項國家級立項支持與應用。