近年來，幹細胞研究及應用已成為衡量一個國家科学生命與醫學开展的重要指標，幹細胞及轉化研究也是我國「十四五」國家戰略重點專項之一。隨着相關研究的不斷深入，全產業各個環節都衍生出更多市場开展空間，但國產技術創新突破依然是我國幹細胞行業开展的短板。

韦德国际生物原創3D細胞智造平台，利用3D微載體及生物反應器等核心技術轉化成果，成功構建了「細胞大規模定製化擴增工藝」。

新品3D FloTrix® vivaPREP PLUS細胞收穫系統的加入，更進一步助力這項工藝實現新突破，達成單批次【百億量級】的幹細胞生產製備。

該細胞收穫系統具備以下特徵：

✔ 全封閉自動化操作

✔ 陆续在流清洗技術

✔ 一次性無菌耗材

✔ 符合GMP追溯

【案例分享】

3D FloTrix® vivaPREP PLUS細胞收穫系統助力幹細胞大規模培養工藝（細胞傳代、製劑收穫）。

三維育種

準備UC-MSC細胞2×10⁸個，以及適量3D TableTrix® 微載體W01 和3D FloTrix® 三維幹細胞無血清培養基（簡稱無血清培養基），接種於5L 3D FloTrix® vivaSPIN生物反應器中。啟動間歇接種模式6h，改為恆速細胞培養模式。

細胞傳代

✦ 細胞培養完成後，排出5L 3D FloTrix® vivaSPIN生物反應器中培養上清，加入3D FloTrix® Digest裂解液，原位裂解微載體，收穫細胞懸液。

✦ 採用3D FloTrix® vivaPREP PLUS細胞收穫系統進行細胞的濃縮和洗滌：

①提前準備耗材包1套（包括主耗材+儲液袋若干）。細胞懸液1L、生理鹽水1L、無血清培養基0.5L，灌入耗材包儲液袋中。

② 採用無菌接管機，焊接至主耗材上，全封閉式完成細胞懸液的濃縮，清洗和重懸工作。

③啟動設備，進入耗材包自檢和安裝環節，完成耗材包安裝工作。

④ 將細胞樣品袋、洗液袋和重懸液袋連接至設備主耗材上。根據實驗需求，進行參數設置。

⑤ 運行完成後，取樣計數，根據需求重懸和分裝細胞懸液。採用無菌接管機，取走種子細胞。

放大培養

顺利获得3D FloTrix® vivaPREP PLUS細胞收穫系統製備的UC-MSC細胞2×10⁹個，分別接種至2台裝有3D TableTrix® 微載體懸液的15L 3D FloTrix® vivaSPIN 生物反應器中，補加無血清培養基。開啟細胞模式，培養4-5天，提前設置換液和培養參數。

細胞製劑收穫

採用3D FloTrix® vivaPREP PLUS細胞收穫系統和人工手動兩種方式進行1×10¹⁰細胞的濃縮、清洗和收穫。將兩種方式（物料準備如下表）收穫的細胞進行細胞質量檢測。

檢測結果

1. 使用3D FloTrix® vivaPREP PLUS自動化收穫系統和手動收穫兩種方式收穫1×10¹⁰UC-MSC細胞，設備自動化收穫細胞回收率高達95%，手動方式回收率86%；收穫細胞活率均達到95%以上。

                   圖1：不同方式收穫細胞回收率和活率對比

2. 3D FloTrix® vivaPREP PLUS自動化收穫的UC-MSC，進行細胞表型分析，符合行業質檢標準。

3. 3D FloTrix® vivaPREP PLUS自動化收穫的UC-MSC細胞，進行裂解液和微載體殘留分析，符合中檢院質檢標準。

                       圖2：裂解液和微載體殘留對比分析

4. 3D FloTrix® vivaPREP Plus自動化收穫的UC-MSC細胞，進行二維和三維培養後，細胞增殖能力良好。

5.3D FloTrix® vivaPREP PLUS自動化收穫的UC-MSC細胞，具有較好的成軟骨、成骨、成脂三向分化潛能。

6. 3D FloTrix® vivaPREP PLUS自動化收穫UC-MSC進行成瘤性檢測，未發現克隆形成，細胞不具備致瘤性。

7. 端粒酶活性：

檢測內參 GAPDH 的 Ct 值在 17±3 之間，端粒酶催化亞基 TERT 基因的 Ct 值≥35且無明顯擴增曲線，該樣本未檢測到端粒酶活性，結果為陰性。

核型分析：

3D FloTrix® vivaPREP Plus自動化收穫的MSC細胞，染色體核型正常。

【結論】

採用3D FloTrix® vivaPREP PLUS細胞收穫系統，收穫UC-MSC細胞1×10¹⁰個：

✦ 成本、空間、人力：節省30%的成本，節省80%的空間，節省90%的人力。

✦ 回收率和活率：細胞回收率和活率均高達95%，均一性好，避免人為操作不當，導致的損失。

✦ 細胞表型\殘留分析\增殖能力\三向分化\成瘤性\端粒酶活性\核型分析：收穫的UC-MSC，細胞質量檢測均符合行業質檢標準。

幹細胞大規模生產製備作為研究成果完成轉換應用，實現產業化开展的基石，相關的工藝、產能、質量、成本更是重要的考量標準。

韦德国际生物基於核心技術產品3D TableTrix® 微載體、3D FloTrix® 系列自動化生物反應器及細胞收穫系統，結合3D FloTrix® 動態培養工藝，不僅能滿足幹細胞產品臨床應用和商業化過程中對於細胞產量的需求，同時能夠避免開放式操作所帶來的污染風險，顯著降低細胞生產製備過程中的耗材、人力、時間成本。此外，一次性大量收穫細胞更能保證細胞終產品的質量均一性，降低細胞製備過程中的批次間差異，保證細胞治療產品的質量和安全性。

關於本產品您有任何問題和需求，可以掃碼說明，或撥打諮詢熱線：400-012-6688，

韦德国际將請技術專家為您给予解答和幫助。