本周hzangs在最新文獻中選取了14篇分享給大家，第1篇文章介紹了工程化細胞外囊泡用於遞送貨物到T細胞，優化細胞免疫療法；第2篇文章介紹了精神分裂症患者神經元來源囊泡miRNA組的變化；第3篇文章介紹了一種將細胞外囊泡注射到單個細胞中的方法；第8篇文章介紹了工程化DC來源囊泡作為免疫疫苗；第12篇文章評估了DC細胞及其細胞外囊泡作為免疫治療策略。

1.Genetically encoding multiple functionalities into extracellular vesicles for the targeted delivery of biologics to T cells.

將多種功能基因編碼到細胞外囊泡中，以將生物製劑靶向遞送至 T 細胞。

[Nat Biomed Eng] PMID: 38012307

摘要：細胞的基因修飾可以優化細胞免疫療法，但將生物製劑特異性輸送到 T 細胞仍然具有挑戰性。在此，韦德国际報告了一套通過細胞基因工程產生細胞外囊泡 (EV) 的方法，該囊泡可在細胞之間自然封裝和轉移蛋白質和核酸，從而無需化學修飾即可將生物製劑靶向遞送至 T 細胞。具體來說，工程細胞分泌的 EV 通過蛋白質標籤主動加載蛋白質貨物，並展示高親和力 T 細胞靶向結構域和融合糖蛋白。韦德国际通過工程化 EV 來驗證方法，該 EV 傳遞 Cas9-gRNA 複合物，以消除原代人 CD4+ T 細胞中編碼 CXC 趨化因子輔助受體 4 型的基因。該策略也適合將生物製劑靶向輸送至其他細胞類型。

2.miRNA cargo in circulating vesicles from neurons is altered in individuals with schizophrenia and associated with severe disease.

在精神分裂症患者中，神經元循環囊泡中的 miRNA貨物發生了改變，並且與嚴重疾病相關。

[Sci Adv] PMID: 38019909

摘要：雖然 RNA 表達似乎在幾種腦部疾病中發生了改變，但屍檢分析的限制使其對於強有力的群體研究和生物標誌物開發來說不切實際。鑒於神經元獨特的分子組成反映在其細胞外囊泡（EV）中，韦德国际假設神經元來源的 EV 的分離提供了一個機會，可以從血液中無創地專門分析其封裝內容物。為了研究這一假設，韦德国际測定了富含微管相關蛋白 1B (MAP1B) 的血清 EV 中的 miRNA 表達，這些血清 EV 源自一大群精神分裂症患者和非精神病對照參與者的神經元。韦德国际觀察到精神分裂症受試者中 miRNA 失調，特別是那些具有治療抵抗性和嚴重認知缺陷的受試者。這些數據支持了精神分裂症與突觸基因表達轉錄後調節的改變有關的假設，並提供了組織特異性 EV 分析在腦部疾病中的潛在用途的例子。

3.Nanoinjection of extracellular vesicles to single live cells by robotic fluidic force microscopy.

通過機械人流體力顯微鏡將細胞外囊泡納米注射到單個活細胞中。

[J Extracell Vesicles] PMID: 38032323

摘要：在過去的十年中，細胞外囊泡（EV）引起了生物醫學界的極大興趣。隨着該領域的進展，韦德国际對細胞對細胞外囊泡的反應有了越來越多的了解。在本技術報告中，韦德国际描述了將 EV 直接納米注射到不同細胞系的單個細胞的細胞質中。通過使用機械人流體力顯微鏡(robotic FluidFM)，將 GFP 陽性 EV 和類 EV 顆粒納米注射到單個活 HeLa、H9c2、MDA-MB-231 和 LCLC-103H 細胞中被證明是可行的。該注射平台具有高細胞選擇性和效率的優點。納米注射的 EV 最初位於細胞質內集中的點狀區域。隨後，它們被運送到細胞的外圍。根據韦德国际的原理驗證數據，機械人 FluidFM 適合通過 EV 靶向單個活細胞，並可能獲得有關單細胞水平的細胞內 EV 貨物輸送的信息。

4.Taurine Inhibits Ferroptosis Mediated by the Crosstalk between Tumor Cells and Tumor-Associated Macrophages in Prostate Cancer.

牛磺酸抑制前列腺癌中腫瘤細胞和腫瘤相關巨噬細胞之間的串擾介導的鐵死亡。

[Adv Sci (Weinh)] PMID: 38031260

摘要：腫瘤相關巨噬細胞（TAM）在腫瘤治療耐藥性中發揮着重要作用。儘管鐵死亡對腫瘤細胞的致命作用已有充分報道，但TAM 如何抑制腫瘤中鐵死亡的影響尚未明確。在這項研究中，證明 TAM 分泌的牛磺酸通過激活肝臟 X 受體 α/硬脂酰輔酶 A 去飽和酶 1 (LXRα/SCD1) 途徑來抑制前列腺癌 (PCa) 中的鐵死亡。通過抑制牛磺酸轉運蛋白 TauT 來阻斷牛磺酸的攝入，可以恢復腫瘤對鐵死亡的敏感性。此外，LXRα激活miR-181a-5p及其結合蛋白FUS的轉錄，以增加腫瘤來源的細胞外囊泡（EV）中miR-181a-5p的募集。據觀察，巨噬細胞似乎是富含 miR-181a-5p 的 EV 的受體細胞。巨噬細胞攝入 miR-181a-5p 會促進其 M2 極化，並通過抑制其靶基因 lats1 的表達來增強牛磺酸輸出，從而使 hippo 通路失活並導致 Yes 相關蛋白 (YAP) 核易位以進行轉錄激活M2 極化相關基因（如 ARG1 和 CD163）以及牛磺酸轉運基因 TauT。總而言之，這些發現表明 PCa 細胞和 TAM 之間的相互作用作為抑制 PCa 鐵死亡的正反饋迴路，由 TAM 分泌的牛磺酸和腫瘤 EV 傳遞的 miR-181a-5p 介導。

5.DNA Nanomaterial-Empowered Surface Engineering of Extracellular Vesicles.

DNA 納米材料賦能的細胞外囊泡表面工程。

[Adv Mater] PMID: 38041689

摘要：細胞外囊泡（EV）是細胞分泌的生物納米顆粒，是細胞間通訊的關鍵介質。它們含有多種生物活性成分，是有前途的診斷生物標誌物和治療劑。它們的納米級膜結合結構和跨越主要生物屏障運輸功能性貨物的先天能力使它們成為藥物輸送載體的有希望的候選者。然而，EV 的複雜生物學和異質性對其在診斷和治療中的受控和可操作應用提出了重大挑戰。最近，具有高生物相容性的DNA分子已成為細胞外囊泡表面工程的優異功能塊。DNA 分子的強大鹼基配對以及由此產生的可編程 DNA 納米材料為 EV 表面提供了精確的結構定製和可調節的物理和化學特性，為 EV 生物醫學應用創造了前所未有的機會。本綜述重點關注利用可編程 DNA 設計細胞外囊泡表面的最新進展。韦德国际總結了 EV 的生物學、功能和生物醫學應用，並介紹了基於 DNA 納米材料的 EV 分離、分析和傳遞的最新成果。最後，韦德国际討論了細胞外囊泡工程的挑戰和新領域。

6.Heterogeneous MXene Hybrid-Oriented Exosome Isolation and Metabolic Profiling for Early Screening, Subtyping and Follow-up Evaluation of Bladder Cancer.

用於膀胱癌早期篩查、亞型分型和隨訪評估的異質MXene 雜交外泌體分離和代謝分析。

[ACS Nano] PMID: 38039354

摘要：基於外泌體代謝物的無創液體活檢是一個新興的研究熱點，可能會取代目前的臨床手段。基於納米結構的質譜分析能夠連續進行外泌體分離和代謝分析，具有卓越的分析速度和高效率。在此，韦德国际構建了一種異質 MXene 雜合體，它具有用於外泌體捕獲的三元結合位點和用於代謝物分析的出色基質性能。通過優化實驗條件，從 60 mL 尿液樣本中提取外泌體及其代謝模式可在 45 秒內完成（每批 40 個樣本，持續 30 分鐘）。根據外泌體代謝模式和隨後建立的生物標誌物組，早期膀胱癌（BCa）在模型訓練和驗證集中能夠區分健康對照，曲線下面積（AUC）值大於0.995。同時，韦德国际在代謝模式盲測中實現了BCa的亞型分類，AUC值為0.867。韦德国际還探索了對隨訪患者敏感的重要生物標誌物，與病理進展相比，這些生物標誌物確實呈現出相反的變化水平。這項研究有可能指導液體活檢方法的發展。

7.Selective cargo sorting in stem cell-derived small extracellular vesicles: impact on therapeutic efficacy for intervertebral disc degeneration.

幹細胞衍生的小細胞外囊泡的選擇性貨物分選：對椎間盤退變治療效果的影響。

[Clin Transl Med] PMID: 38037469

摘要：越來越多的證據表明幹細胞衍生的小細胞外囊泡（sEV）在椎間盤退變（IVDD）中的作用。當供體細胞遭受氧化應激時，sEV（尤其是 miRNA）的貨物分選可能會受到影響。在這裏，韦德国际發現含有特定基序的 miRNA 會選擇性地分選到間充質幹細胞 (MSC) 內的腔內囊泡中，以響應氧化應激。使用 miRNA 測序對源自正常 MSC（C-sEV）或應激 MSC（T-sEV）的 sEV 中的 miRNA 貨物進行分析。通過生物信息學分析評估 sEV 中差異表達的 miRNA 和基序的識別。使用免疫熒光染色和免疫沉澱分析評估蛋白質結合。此外，還採用RNA Pull Down 和 RNA 免疫沉澱 (RIP) 免疫沉澱來確定 miRNA 和蛋白質之間的結合。通過體外檢測表型基因的表達水平或體內組織學評估來比較C-sEV和T-sEV對IVDD的影響。miRNA的分選過程是通過異質核核糖核蛋白的核質轉運介導的，進而促進SNAP25的磷酸化並促進sEV的轉運和分泌。此外，CHMP1B 在膜修復中發揮作用，並防止氧化應激引起的細胞鐵死亡，同時影響 sEV 的釋放。值得注意的是，與鐵死亡相關的幹細胞衍生的 sEV 會損害 IVDD 的治療效果。然而，含有特定 miRNA 抑制劑的工程化 sEV 的應用顯示出在體外和體內恢復 IVDD 治療功效的潛力。總而言之，韦德国际的研究結果揭示了 miRNA 分類為 sEV 的機制，並為椎間盤再生過程中基於 sEV 的治療的優化提供了新的見解。

8.Small Extracellular Vesicles Derived from Altered Peptide Ligand-Loaded Dendritic Cell Act as A Therapeutic Vaccine for Spinal Cord Injury Through Eliciting CD4(+) T cell-Mediated Neuroprotective Immunity.

源自改變的肽配體負載樹突狀細胞的小細胞外囊泡通過引發 CD4(+) T 細胞介導的神經保護性免疫，作為脊髓損傷的治療疫苗。

[Adv Sci (Weinh)] PMID: 38037457

摘要：不同CD4+T細胞亞群之間的平衡對於修復受損的脊髓至關重要。樹突狀細胞 (DC) 衍生的小細胞外囊泡 (DsEV) 可有效激活 T 細胞免疫。源自髓磷脂鹼性蛋白 (MBP) 的改變肽配體 (APL) 已被證明可以影響 CD4+ T 細胞亞群並降低神經炎症水平。然而，由於 APL 穩定性差和相關副作用，其應用具有挑戰性。在此，證明 DsEVs 可以作為 APL MBP87-99 | A91 | (A91-DsEVs)的載體，誘導 2 個輔助性 T (Th2) 和調節性 T (Treg) 細胞的激活，以治療小鼠脊髓損傷 (SCI)。這些受刺激的CD4+ T細胞可以有效地「歸巢」到病灶區域，通過誘導M2巨噬細胞/小膠質細胞的激活、抑制炎症細胞因子的表達、增加神經營養因子的釋放來建立有益的微環境。A91-DsEV 介導的微環境可能增強軸突再生、保護神經元並促進髓鞘再生，這可能支持 SCI 模型小鼠運動功能的恢復。總之，使用 A91-DsEV 作為治療性疫苗可能有助於在 SCI 治療中誘導神經保護性免疫。

9.RAB27B-regulated exosomes mediate LSC maintenance via resistance to senescence and crosstalk with the microenvironment.

RAB27B 調節的外泌體通過抗衰老和與微環境的串擾來介導LSC 維持。

[Leukemia] PMID: 38036630

摘要：白血病幹細胞（LSC）的命運由其固有機制和與其生態位的串擾決定。儘管LSC被證實可以通過重新開始衰老來根除，但LSC抵抗衰老和重塑生態位以獲得適合乾性的微環境的具體關鍵調節因素仍然未知。在這裏，韦德国际發現 RAB27B（一種調節外泌體分泌的基因）在 LSC 中過度表達，並與急性髓系白血病（AML）患者的不良預後相關。LSC 中RAB27B 的增加可防止其衰老並在體外和體內維持其乾性。從機制角度來看，LSC 中 RAB27B 表達的增加通過直接組合選擇性地促進富含衰老誘導蛋白的外泌體的裝載和釋放。此外，RAB27B 調節的 LSC 衍生的外泌體重塑了生態位，並誘導間充質幹細胞 (MSC) 衰老，並在體外和體內增加了 RAB27B 表達。衰老 MSC 中 RAB27B 的增加反過來通過選擇性分泌富含乾性促進蛋白的外泌體促進 LSC 的體外和體內維持。

10.Extracellular Vesicles in Infrapatellar Fat Pad from Osteoarthritis Patients Impair Cartilage Metabolism and Induce Senescence.

骨關節炎患者髕下脂肪墊中的細胞外囊泡會損害軟骨代謝並誘導衰老。

[Adv Sci (Weinh)] PMID: 38036301

摘要：髕下脂肪墊（IPFP）與膝骨關節炎（OA）的發生和進展密切相關，但其潛在機制仍不清楚。在這裏，韦德国际發現來自 OA 患者的 IPFP 可以分泌小細胞外囊泡 (sEV) 並將其輸送到關節軟骨細胞中。GW4869 抑制內源性骨關節炎 IPFP-sEV 的釋放可顯着減輕 IPFP-sEV 誘導的軟骨破壞。體外功能測定表明，IPFP-sEVs 顯着促進軟骨細胞細胞外基質（ECM）分解代謝並誘導細胞衰老。進一步證明，IPFP-sEVs 誘導人和小鼠軟骨外植體中的 ECM 降解，並加劇小鼠實驗性 OA 的進展。從機制上講，IPFP-sEV 中高度富集的 let-7b-5p 和 let-7c-5p 對於通過直接減少衰老負調節因子核纖層蛋白 B 受體 (LBR) 來介導有害影響至關重要。值得注意的是，在小鼠體內關節內注射抑制let-7b-5p和let-7c-5p的antagomir可增加LBR表達，抑制軟骨細胞衰老並改善實驗性OA模型的進展。本研究揭示了 IPFP-sEVs 在 OA 進展中的功能和機制。靶向let-7b-5p和let-7c-5p的IPFP-sEVs貨物可以為OA治療提供潛在的策略。

11.Hypoxia endothelial cells-derived exosomes facilitate diabetic wound healing through improving endothelial cell function and promoting M2 macrophages polarization.

缺氧內皮細胞衍生的外泌體通過改善內皮細胞功能和促進M2 巨噬細胞極化來促進糖尿病傷口癒合。

[Bioact Mater] PMID: 38034500

摘要：當務之急是制定和實施更新、更有效的策略來解決難治性糖尿病傷口。截至目前，這些傷口目前還沒有最佳的解決方案。缺氧人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）來源的外泌體被認為可以促進糖尿病傷口癒合，但其作用和分子機制需要進一步研究。在這項研究中，韦德国际旨在研究缺氧外泌體是否能促進糖尿病患者的傷口癒合。根據韦德国际的高通量測序，與常氧外泌體相比，在缺氧外泌體中發現了差異表達的lncRNA（包括64個上調的lncRNA和94個下調的lncRNA）。有趣的是，lncHAR1B是缺氧外泌體中顯着上調的 lncRNA 之一，與糖尿病傷口癒合顯着相關。更具體地說，缺氧的外泌體被傳遞到周圍細胞，導致lncHAR1B水平顯着升高，從而緩解內皮細胞的功能障礙，促進高糖條件下從M1型巨噬細胞向M2型巨噬細胞的轉變。從機制上講，lncHAR1B直接與轉錄因子鹼性螺旋-環-螺旋家族成員e23（BHLHE23）相互作用，隨後導致其與KLF轉錄因子4（KLF4）結合併促進KLF4表達。在韦德国际的體內實驗中，與常氧外泌體負載的 HGM-QCS 水凝膠 (Gel-N-Exos) 相比，使用缺氧外泌體負載的 HGM-QCS 水凝膠 (Gel-H-Exos) 導致傷口快速癒合。因此，韦德国际的研究提供了潛在的新穎治療方法，旨在加速傷口癒合和開發實用的外泌體遞送平台。

12.Functional evaluation of dendritic cells and extracellular vesicles as immunotherapy for breast cancer.

樹突狀細胞和細胞外囊泡作為乳腺癌免疫療法的功能評估。

[Oncogene] PMID: 38030790

摘要：樹突狀細胞 (DC) 在識別並向 T 細胞呈遞抗原方面發揮着關鍵作用。它們分泌樹突狀細胞衍生的細胞外囊泡（DC-sEV），可以模仿 DC 的功能。因此，韦德国际在本研究中探討了使用 DC-sEV 作為潛在的個性化疫苗的可能性。韦德国际比較了 DC 和 DC-sEV 在刺激免疫系統靶向乳腺癌細胞方面的功效，發現與親本 DC 相比，DC-sEV 表面具有明顯更多的 MHC 分子。在韦德国际的體內和體外測試中，Dc-sEV 在功效、安全性、儲存和潛在遞送優勢方面顯示出優於 DC 的顯着優勢。 DC-sEV 能夠抑制免疫冷乳腺腫瘤的生長，而 DC 則不能。這些結果表明 DC-sEV 作為乳腺癌個體化免疫療法的強大潛在效用。

13.Exosomes derived from impaired liver aggravate alveolar bone loss via shuttle of Fasn in type 2 diabetes mellitus.

在 2 型糖尿病中，源自受損肝臟的外泌體通過 Fasn 穿梭加劇牙槽骨丟失。

[Bioact Mater] PMID: 38024229

摘要：2型糖尿病（T2DM）會加劇牙周炎中不可逆的骨質流失，但T2DM代謝過程異常導致骨再生受損的機制仍不清楚。外泌體被認為是糖尿病通過器官或組織通訊再生受損的關鍵介質。在這裏，韦德国际發現來自 T2DM 代謝受損肝臟的異常升高的外泌體在牙周區域顯着富集，並誘導牙周膜細胞(PDLC) 焦亡。從機制上講，脂肪酸合酶（Fasn）是糖尿病外泌體中主要的差異表達分子，導致 PDLC 中異位脂肪酸合成，並激活gasdermin D 的裂解。肝臟 Fasn 的消耗可有效減輕 PDLC 焦亡並減輕骨丟失。韦德国际的研究結果闡明了糖尿病牙周炎加劇骨丟失的機制，並揭示了外泌體介導的「肝-骨」軸器官通訊，為未來糖尿病骨疾病的預防和治療提供了線索。

14.Proteome and immune responses of extracellular vesicles derived from macrophages infected with the periodontal pathogen Tannerella forsythia.

感染牙周病原菌Tannerella forsythia的巨噬細胞衍生的細胞外囊泡蛋白質組和免疫反應。

[J Extracell Vesicles] PMID: 38014595

摘要：牙周炎是由齦下菌斑內的牙周病原菌引起的慢性炎症性疾病，與全身炎症性疾病有關。從宿主細胞和病原體釋放的細胞外囊泡（EV）攜帶多種生物分子，因其在疾病進展中的作用和作為診斷標記物而引起人們的興趣。在本研究中，韦德国际分析了感染牙周病原體Tannerella forsythia的巨噬細胞衍生的 EV蛋白質組和炎症反應。通過尺寸排阻色譜結合密度梯度超速離心，從Tannerella forsythia感染的巨噬細胞的細胞條件培養基中分離EV，包括巨噬細胞來源的EV和Tannerella forsythia來源的OMV。蛋白質組分析表明，在Tannerella forsythia感染中，巨噬細胞衍生的 EV 富含與牙周炎進展相關的促炎細胞因子和炎症介質。Tannerella forsythia衍生的 OMV 含有多種已知的毒力因子，包括BspA、唾液酸酶、GroEL 和各種細菌脂蛋白。Tannerella forsythia衍生的 OMV 通過 TLR2 激活誘導促炎症反應。此外，韦德国际還證明，當Tannerella forsythia遇到巨噬細胞衍生的可溶性分子時，Tannerella forsythia會主動釋放 OMV。總而言之，韦德国际的結果提供了對牙周病原體感染細胞衍生的 EV 特徵的深入了解。

今天的整理就到這裏。希望大家可以有所收穫。大家下周見！