【戰鬥準備】

"ROCK"一下，戰鬥力更強

現階段臨床實踐中使用的大多數NK細胞都是限量生產的，無法滿足所有患者的需求。且NK細胞的大規模生產通常需要14至28天，而傳統的手動生產過程需要頻繁補充新鮮培養基、細胞因子和生長因子，以確保NK細胞在最佳環境中生長；這無疑增加了引入外來污染物的風險，並需要投入大量的人力和財力。

NK細胞大規模擴增系統

與頻繁手動操作的方法相比，搖擺式、全封閉、自動化的培養條件下產生的活性NK細胞數量更多。特別是一次性搖擺式培養系統，不僅具備全封閉環境、一次性耗材、波浪式混勻方式，不需要反覆更換液體或操作細胞，大大降低污染風險；特殊的波浪搖擺方式，還能夠更好的促進氧融合、降低剪切力。韦德国际生物推出的3D FloTrix® vivaROCK生物反應器系統，正是這樣一款設備。

3D FloTrix® vivaROCK生物反應器系統

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NK細胞擴增-實驗數據

細胞信息：NK-92

接種條件：2×10⁵cells/mL，200mL體系培養

設備參數：搖擺控制6° 6rpm，培養溫度37℃+0.2 ℃ ，過濾膜溫度55 ℃ ，pH7.2±0.05（關聯CO2），DO 50%±5%，總進氣量500sccm，O2和CO2最大進氣量均為250sccm，壓力上限31.0mbar。

細胞密度：達2.0×10⁶cells/mL

細胞活率：細胞活率>70%

增殖情況：設備培養11天，細胞增殖20倍

細胞殺傷性：效靶比為10:1時，K562細胞殺傷率為75%

【戰鬥開始】

Round 1-直接殺傷

NK細胞直接通過胞吐作用，釋放穿孔素和顆粒酶等細胞毒性顆粒，穿孔素在靶細胞表面穿孔，使顆粒酶進入靶細胞誘導靶細胞凋亡。

Round 2-誘導細胞凋亡

活化NK細胞表達Fas（CD95）配體和TRAIL（腫瘤壞死因子相關誘導凋亡配體）分子，誘導CD95+靶細胞和TRAIL受體陽性的靶細胞通過內源酶的級聯反應發生凋亡，使靶細胞進入程序性凋亡狀態。

Round 3-細胞因子介導殺傷

NK細胞能合成和分泌多種細胞因子（如IFN-γ、TNF-α、IL1、IL5、IL8、IL10和G-CSF等），直接作用於靶細胞，或通過進一步激活其他種類免疫細胞攻擊靶細胞。

Round 4-抵抗依賴性細胞介導的細胞毒性作用

NK細胞低親和力的CD16分子與靶細胞IgG抗體複合物結合後，活化蛋白酪氨酸激酶（PTK），使PLC γ的酪氨酸磷酸化，裂解膜磷酯酰肌醇為三磷酸肌醇（IP3）和二酰甘油，IP3增加細胞內游離鈣濃度，進而釋放細胞毒性物質（如穿孔素和顆粒酶）。

【戰鬥成果（部分）】

對抗肺癌

與肺癌相關的惡性腫瘤在全世界腫瘤中的發病率和死亡率最高。肺癌在臨床中又分為非小細胞肺癌（NSCLC）和小細胞肺癌（SCLC）兩種，而NSCLC約佔肺癌診斷總數的85%。特別是肺癌中的腺癌，由於上皮生長因子受體（EGFR）突變，總是以對化療反應不佳為特徵，這也導致預後不良。在東亞人中，超過40%的肺癌腺癌患者具有EGFR突變。

一項於發表於《Precision Clinical Medicine》雜誌的研究，主要探討自然殺傷（NK）細胞免疫療法對有或無EGFR突變的非小細胞肺癌的有效性，以評估緩解率（RR）和無進展生存期（PFS）。

結果表明，NK細胞治療組的緩解率（RR）為75％，明顯高於非NK治療組的16.7％（P<0.01）。 通過評估免疫功能、腫瘤生物標誌物、CTC、KPS和PFS的變化，此研究證明了NK細胞治療對EGFR突變陽性的肺腺癌具有更好的臨床治療效果[1]。

對抗肝癌

肝癌（HCC）是目前全球第六大常見癌症。但目前治療肝癌的方法，對生存結果的影響有限。因此，患者對局部晚期肝癌的新興治療手段有着很大的需求。

2022年6月，Frontiers in Immunology期刊上發表了題為「A Phase I Study of Locoregional High-Dose Autologous Natural Killer Cell Therapy With Hepatic Arterial Infusion Chemotherapy in Patients With Locally Advanced Hepatocellular Carcinoma」的研究論文，主要探討基於NK細胞的免疫治療的安全性，並關注治療後的客觀緩解率（ORR）、無進展生存期（PFS）、總生存期（OS）和免疫學反應。

臨床研究表明，HAIC與局部區域大劑量NK細胞療法結合，明顯顯示出良好的治療反應：ORR為63.6%，中位PFS為10.3個月，中位OS為41.6個月。且無論給予何種劑量的 VAX-NK/HCC，治療耐受性都顯示良好，對於標準治療無效的局部晚期HCC患者將是一種安全有效的治療方法[2]。

對抗子宮內膜癌

子宮內膜癌（EC）在全球範圍內的發病率和疾病相關死亡率不斷上升。儘管有針對晚期或復發性子宮內膜癌的標準治療，但療效和預後仍然較差，這突出了創新療法的必要性。

2023年6月，Frontiers in Immunology期刊上發表了題為「Case Report: Cord blood-derived natural killer cells as new potential immunotherapy drug for solid tumor: a case study for endometrial cancer」的研究論文，研究表明：臍帶血來源的NK細胞療法有望成為癌症的一種有效治療方法。

臨床結果表明，CB-NK細胞治療子宮內膜癌是安全有效的。這項試驗為癌症免疫療法開闢了一條新的途徑，並啟發了使用CB-NK細胞進行進一步的臨床研究。CB-NK細胞有潛力成為治療惡性腫瘤的新型「免疫藥物」。CB-NK細胞對子宮內膜癌的良好活性在臨床上得到了證明，未來有望在臨床上幫助越來越多的子宮內膜癌患者，並且拓展到其他癌症的治療中[3]。

【戰鬥總結】

為NK細胞提供搖擺式、全封閉、自動化的培養條件——3D FloTrix® vivaROCK 生物反應器系統，不需要反覆更換液體或操作細胞，大大降低污染風險，還能夠更好的促進氧融合、降低剪切力，讓NK細胞「充分發育」，活性NK細胞數量更多，大大增強「戰鬥力」。

NK細胞獨特的抗腫瘤效應，不受MHC限制的細胞毒性、產生細胞因子和免疫記憶等功能，使其成為先天性和適應性免疫反應系統中的關鍵角色。NK細胞的「親切友好」：更加輕微的副作用、更廣泛的適用範圍、可長期接受治療、可用於預防復發及轉移，在眾多癌症治療臨床研究中得以體現。

早期臨床數據也表明：NK細胞非常適合用於異體治療環境。CAR-NK細胞療法是一個很有前途的臨床研究領域，對某些癌症患者具有良好的安全性和初步療效。相信基於NK細胞的免疫療法，將會推動癌症免疫治療的革命性進展，為更多患者帶來新的可能。