本周hzangs在最新文獻中選取了12篇分享給大家，第1篇文章介紹了一種顺利获得設計蛋白質-脂質相互作用來優化細胞外囊泡貨物裝載的策略；第2駢文介紹了使用EV-mRNA進行基因治療，改善溶酶體貯積症的策略，並證實在治療過程中存在旁觀者效應；第3篇文章分析表明，使用納米流式分析患者血液來源細胞外囊泡是潛在的AD等疾病的診斷策略；第6篇文章綜述了適配體在外泌體分析中的應用，第10篇文章介紹了中性粒細胞和巨噬細胞顺利获得細胞外囊泡通訊調控細胞因子風暴的機制。

1.Enhancing extracellular vesicle cargo loading and functional delivery by engineering protein-lipid interactions. 

顺利获得設計蛋白質-脂質相互作用來增強細胞外囊泡貨物裝載和功能輸送。

[Nat Commun] PMID: 38965227

摘要：自然生成的脂質納米顆粒被稱為細胞外囊泡 (EV)，作為可工程化的治療遞送載體具有重大前景。然而，以可用於遞送的方式將蛋白質貨物主動裝載到 EV 中仍然是一個挑戰。在這裏，韦德国际證明，顺利获得合理設計蛋白質以運輸到質膜並與脂質筏結合，韦德国际可以增強蛋白質貨物向 EV 中的裝載，以取得一組結構多樣的跨膜和外周膜蛋白。然後，韦德国际展示了選擇脂質標籤介導增加 EV 負載和功能性遞送工程轉錄因子以調節靶細胞中的基因表達的能力。韦德国际設想可以利用這項技術來開發新的基於 EV 的療法，以遞送各種大分子貨物。

2.AAV gene replacement therapy for treating MPS IIIC: Facilitating bystander effects via EV-mRNA cargo. 

AAV 基因替代療法治療 MPS IIIC：顺利获得 EV-mRNA 貨物促進旁觀者效應。

[J Extracell Vesicles] PMID: 38961538

摘要：MPS IIIC 是一種溶酶體貯積症，由肝素-α-葡萄糖胺 N-乙酰轉移酶(HGSNAT) 突變引起，现在尚無治療方法。由於 HGSNAT 是一種反溶酶體膜蛋白，因此 MPS IIIC 的基因療法需要轉導儘可能多的細胞才能取得最大益處。所有細胞都會持續釋放細胞外囊泡 (EV)，並顺利获得 EV 運輸交換生物分子進行通信。為了滿足未滿足的需求，韦德国际開發了一種 rAAV-hHGSNATEV 載體，該載體在 3'UTR 中帶有 EV-mRNA 包裝信號以促進旁觀者效應，並在體外 MPS IIIC 模型中對其進行了測試。在人類 MPS IIIC 細胞中，rAAV-hHGSNATEV 增強了 HGSNAT mRNA 和蛋白質表達、EV-hHGSNAT-mRNA 包裝並清除了 GAG 儲存。重要的是，與 EV 一起孵育可導致受體 MPS IIIC 細胞中 hHGSNAT 蛋白表達和 GAG 含量清除。此外，rAAV-hHGSNATEV 轉導可導致 MPS IIIC 細胞中的病理 EV 減少到正常水平，表明具有更廣泛的治療益處。這些數據表明，將 EV-mRNA 包裝信號整合到 rAAV-hHGSNAT 載體中可增強 hHGSNAT-mRNA 的 EV 包裝，後者可轉運到未轉導細胞並翻譯成功能性 rHGSNAT 蛋白，從而促進疾病病理的交叉校正。這項研究支持 rAAVEV 對 MPS IIIC 和廣泛疾病的治療潛力，而無需轉導每個細胞。

3.Nanoscale flow cytometry-based quantification of blood-based extracellular vesicle biomarkers distinguishes MCI and Alzheimer's disease. 

基於納米級流式細胞術的血液細胞外囊泡生物標誌物量化可區分 MCI 和阿爾茨海默病。

[Alzheimers Dement] PMID: 38958575

摘要：準確檢測阿爾茨海默病 (AD) 是治療進步的關鍵一步。现在，檢測費用昂貴，需要侵入性採樣或放射線照射。韦德国际開發了一種基於納米級流式細胞術 (nFC) 的細胞外囊泡 (EV) 檢測方法，以篩查輕度認知障礙 (MCI)、AD 或對照組血漿中的生物標誌物。循環澱粉樣蛋白β (Aβ)、tau、磷酸化 tau (p-tau)181、p-tau231、p-tau217、p-tauS235、泛素和溶酶體相關膜蛋白 1 陽性 EV 可區分 AD 樣本。p-tau181、p-tau217、p-tauS235和泛素陽性 EV 可區分 MCI 樣本。最敏感的 AD 區分標誌物是 p-tau231，其受試者工作特徵曲線下面積 (AUC) 為 0.96（敏感性0.95/特異性 1.0），與 p-tauS235 結合時 AUC 可提高至 0.989。這種基於nFC 的檢測方法無需分離 EV 即可準確區分 MCI 和 AD 血漿，给予了一種需要極少量樣本的快速方法。將基於 nFC 的測量結果納入更大的群體並與「金標準」生物標誌物進行比較是開發 AD 診斷工具的下一個令人興奮的步驟。

4.Peroxiredoxin 3 deficiency exacerbates DSS-induced acute colitis via exosomal miR-1260b-mediated barrier disruption and pro-inflammatory signaling. 

過氧化物酶 3 缺乏顺利获得外泌體 miR-1260b 介導的屏障破壞和促炎信號加劇 DSS 誘導的急性結腸炎。

[Antioxid Redox Signal] PMID: 38970422

摘要：過氧化物酶 3 (Prdx3) 是一種細胞內抗氧化酶，特異性定位於線粒體中，顺利获得清除線粒體活性氧(ROS) 來防止氧化應激。腸道上皮给予了物理和生化屏障，將宿主組織與共生菌隔離開來，以維持腸道穩態。細胞抗氧化防禦系統和氧化應激之間的不平衡與炎症性腸病 (IBD) 的發病機制有關。然而，Prdx3 在腸道炎症下在腸道上皮中的作用尚未闡明。為了研究 Prdx3 在腸道炎症中的潛在作用，韦德国际使用了腸道上皮細胞 (IEC) 特異性 Prdx3 敲除小鼠。IEC 特異性Prdx3 缺陷小鼠表現出更嚴重的結腸炎表型，體重減輕、結腸縮短、屏障破壞、線粒體損傷和 IEC 中的 ROS 生成程度更大。此外，在 Prdx3 敲低的結腸上皮細胞中，外泌體 miR-1260b 顯著增加。從機制上講，Prdx3 缺陷顺利获得 P38-MAPK/NF魏B 信號傳導促進腸道屏障破壞和炎症。韦德国际的研究揭示了外泌體負載的 miRNA，特別是 miR-1260b，在 IBD 中的作用。靶向 miR-1260b 或調節外泌體介導的細胞間通訊可能有望成為管理 IBD 和恢復腸道屏障完整性的潛在治療策略。

5.The role of gut microbiota, exosomes, and their interaction in the pathogenesis of ALD. 

腸道微生物群、外泌體及其相互作用在 ALD 發病機制中的作用。

[J Adv Res] PMID: 38969094

摘要：酒精濫用引起的肝臟疾病被稱為酒精性肝病（ALD），包括酒精性脂肪變性、酒精性脂肪性肝炎、酒精性肝炎和酒精性肝硬化，對人類健康構成重大威脅。现在，ALD的發病機制尚未完全明確，可能與酒精及其代謝產物造成的直接損害、氧化應激、腸道菌群失調和外泌體有關。現有研究表明腸道菌群和外泌體都參與了ALD的开展。此外，腸道菌群和外泌體之間存在相互作用。韦德国际討論這種相互作用是否在ALD的發病機制中發揮作用，以及它是否可以成為ALD治療的潛在治療靶點。綜述的關鍵科學概念：慢性酒精攝入會改變腸道菌群的多樣性和組成，這極大地促進了ALD的進展。一些針對腸道菌群的方法，包括益生菌、糞便菌群移植和噬菌體療法，已被證實在許多動物實驗和/或多項臨床試驗中能有效改善 ALD。在ALD 中，外泌體的水平和 microRNA 的表達譜也發生了變化，從而影響 ALD 的發病機制。此外，外泌體與腸道菌群之間存在相互作用，這也可能是 ALD 的致病因素。

6.Empowering Exosomes with Aptamers for Precision Theranostics. 

利用適體增強外泌體以實現精準治療診斷。

[Small Methods] PMID: 38967170

摘要：外泌體是一種典型的小膜囊泡（30-150納米），作為細胞間通訊的信息信使，在生物系統的生理和病理過程中發揮着至關重要的作用。越來越多的研究表明，外泌體是治療診斷的潛在生物候選物，包括基於液體活檢的診斷和藥物輸送。然而，它們的臨床應用受到幾個問題的阻礙，特別是它們的檢測不特異性和靶向性不足。如何提高基於外泌體的治療診斷的準確性正在被廣泛探索。適體憑藉其令人欽佩的特性，被用作優異的分子識別元素，為外泌體给予精準治療診斷的能力。由於適體對靶標具有高親和力且易於位點修飾，可以與特異性檢測外泌體的平台結合，從而為推進疾病診斷给予機會。此外，適體可以在外泌體上進行定製和功能化，以實現靶向治療。本文重點介紹了適體對外泌體在精準治療診斷方面的應用。第一时间簡要介紹了外泌體和適體，然後討論了基於適體的外泌體檢測在疾病診斷方面的最新進展，以及適體功能化的外泌體在靶向治療方面的新興應用。最後，介紹了該研究領域现在面臨的挑戰和機遇。

7.A new subtype of artificial cell-derived vesicles from dental pulp stem cells with the bioequivalence and higher acquisition efficiency compared to extracellular vesicles. 

一種來自牙髓幹細胞的新型人工細胞衍生囊泡亞型，與細胞外囊泡相比具有生物等效性和更高的獲取效率。

[J Extracell Vesicles] PMID: 38965648

摘要：來自牙髓幹細胞 (DPSC) 的細胞外囊泡 (EVs) 在多種疾病模型中顯示出極好的療效。然而，现在的生產方法無法滿足臨床治療的需求。在這項研究中，韦德国际提出了一種創新方法，顺利获得提取和純化 DPSC 裂解物釋放的內容物，即細胞內囊泡，大幅提高「人工細胞衍生囊泡 (ACDVs)」的產量。對 ACDVs 和顺利获得超速離心取得的 ACDVs 進行了比較分析。從細胞裂解物中提取的 ACDVs 符合 EVs 的一般標準，並具有相似的蛋白質分泌特徵。新的 ACDVs 也像 EVs 一樣顯著促進傷口癒合，增加或減少膠原蛋白再生，並減少炎症因子的產生。更重要的是，與使用超速離心法提取的 EVs 相比，提取效率提高了 16 倍。憑藉其令人印象深刻的特性，這種新的 ACDV 亞型成為未來再生醫學臨床應用的潛在候選者。

8.Exosomal proteomics and cytokine analysis distinguish silicosis cases from controls.

外泌體蛋白質組學和細胞因子分析可以區分矽肺病病例和對照。

[Environ Pollut] PMID: 38945194

摘要：職業性二氧化矽暴露造成嚴重的矽肺疾病負擔，现在缺乏靈敏有效的矽肺生物標誌物，矽肺的發病機制尚不明確。外泌體在矽肺發病中具有重要意義，本研究從外泌體蛋白質組學和細胞因子分析兩個方面召开。第一时间，採用Luminex多重檢測技術檢測矽肺患者血漿中細胞因子的水平，結果顯示，矽肺患者血漿中TNF-α、IL-6、CCL2、CXCL10、PDGF-AB的水平顯著高於矽肺工人和對照組（p < 0.05）。經相關性分析，血漿中細胞因子水平與外泌體蛋白濃度呈正相關。其次對篩選人群血漿來源的外泌體進行數據非依賴採集（DIA），在暴露/對照、矽肺/對照、矽肺/暴露、矽肺Ⅱ期Ⅲ期組中分別鑑定出88、151、293、53個差異表達蛋白（DEP）。經過獨立驗證人群的平行反應監測（PRM）後，結果顯示篩選與驗證結果中15個DEP的變化趨勢一致。相關性分析結果顯示，血漿TNF-α水平與外泌體DSP、KRT78、SERPINB12、CALML5表達呈負相關，TNF-α與CALML5聯合測定的AUC達0.900，靈敏度為0.714，特異度為0.933。總體而言，本研究揭示了矽肺患者、接觸矽工人和對照組的外泌體蛋白質組學特徵，表明外泌體在矽肺發病機制中具有重要意義。研究還揭示了血漿細胞因子水平與外泌體DEPs表達的結合可以提高檢測效率。本研究為矽肺生物標誌物的開發给予了方向，並為今後矽肺發病機制研究给予了科學依據。

9.Oxidative stress induces extracellular vesicle release by upregulation of HEXB to facilitate tumour growth in experimental hepatocellular carcinoma. 

氧化應激顺利获得上調 HEXB 誘導細胞外囊泡釋放，促進實驗性肝細胞癌中的腫瘤生長。

[J Extracell Vesicles] PMID: 38944674

摘要：細胞外囊泡 (EV) 在引發腫瘤侵襲行為中起着至關重要的作用。然而，腫瘤細胞產生 EV 的能量過程仍然不太清楚。在這裏，韦德国际證明了 β-己糖胺酶 B (HEXB) 參與介導氧化應激反應中的 EV 釋放，從而促進肝細胞癌 (HCC) 的开展。從機制上講，活性氧 (ROS) 刺激轉錄因子 EB (TFEB) 的核易位，導致 HEXB 及其反義 lncRNA HEXB-AS 的上調。HEXB-AS 可以結合 HEXB 形成蛋白質/RNA 複合物，從而提高 HEXB 的蛋白質穩定性。穩定的 HEXB 與溶酶體相關膜糖蛋白 1 (LAMP1) 相互作用，破壞溶酶體-多囊泡體 (MVB) 融合，從而保護EV 免於降解。敲低 HEXB 可有效抑制 EV 釋放並抑制體內和體外 HCC 生長。此外，顺利获得 M-31850 靶向 HEXB 可顯著抑制 HCC 生長，尤其是與外泌體釋放抑制劑 GW4869 結合使用時。韦德国际的研究結果強調了 HEXB 作為促進 HCC 开展過程中 EV 釋放的調節劑的關鍵作用。

10.Neutrophil-macrophage communication via extracellular vesicle transfer promotes itaconate accumulation and ameliorates cytokine storm syndrome. 

中性粒細胞-巨噬細胞顺利获得細胞外囊泡轉移進行通訊，促進衣康酸積累並改善細胞因子風暴綜合徵。

[Cell Mol Immunol] PMID: 38745069

摘要：細胞因子風暴綜合徵 (CSS) 是一種危及生命的全身炎症綜合徵，涉及由各種療法、感染和自身免疫性疾病引發的先天免疫過度活躍。然而，先天免疫細胞之間的潛在相互作用尚未完全分析。在這裏，使用 poly I:C 和脂多糖 (LPS) 誘導的細胞因子風暴模型，在 CSS 模型中確定了中性粒細胞顺利获得調節巨噬細胞活化而發揮的保護作用。活體成像顯示肝臟和脾臟中的中性粒細胞衍生的細胞外囊泡 (NDEV) 被巨噬細胞捕獲。當體外共培養或注入 CSS 模型時，NDEV 可抑制巨噬細胞產生促炎細胞因子。用 NDEV 治療的巨噬細胞的代謝分析顯示，抗炎代謝物衣康酸的水平升高，衣康酸是由順烏頭酸在克雷布斯循環中由順烏頭酸脫羧酶 (Acod1，由 Irg1 編碼) 產生的。巨噬細胞中的 Irg1 對 NDEV 介導的抗炎作用至關重要，但中性粒細胞中的 Irg1 則不然。從機制上講，NDEV 傳遞了 miR-27a-3p，抑制了 Suclg1 的表達，Suclg1 是編碼代謝衣康酸的酶的基因，從而導致衣康酸在巨噬細胞中積累。這些發現表明，由細胞外囊泡介導的中性粒細胞與巨噬細胞之間的通訊對於促進 CSS 中巨噬細胞的抗炎重編程至關重要，可能對這種致命疾病的治療具有潛在意義。

11.Small Extracellular Vesicle piR-hsa-30937 Derived from Pancreatic Neuroendocrine Neoplasms Upregulates CD276 in Macrophages to Promote Immune Evasion. 

源自胰腺神經內分泌腫瘤的小細胞外囊泡piR-hsa-30937 上調巨噬細胞中的 CD276 以促進免疫逃避。

[Cancer Immunol Res] PMID: 38572963

摘要：PIWI 相互作用 RNA (piRNA) 在腫瘤微環境 (TME) 中源自胰腺神經內分泌腫瘤 (PNEN) 的小細胞外囊泡 (sEV) 中的作用仍未得到探索。韦德国际使用多重 IHC 分析了 PNEN 上 CD68、CD276 (B7H3) 和 CD3 的表達。CD276+ 腫瘤相關巨噬細胞 (TAM) 在腫瘤組織中比非腫瘤組織中更豐富，並且與 T 細胞浸潤呈負相關。進行了血清 sEV piRNA 測序以鑑定在 PNEN 患者中富集的 piRNA。然後，韦德国际研究了 sEV piR-hsa-30937 在 PNEN TME 中腫瘤細胞和巨噬細胞之間的串擾中的功能和機制。PNEN 衍生的 sEV piR-hsa-30937 靶向 PTEN 以激活 AKT 通路並驅動 CD276 表達。CD276+巨噬細胞抑制 T 細胞增殖和 IFNγ 產生。piR-hsa-30937 敲低和抗 CD276 治療顺利获得增強 T 細胞免疫抑制 PNEN 臨床前模型中的進展和轉移。因此，韦德国际的數據表明 PNEN 衍生的 sEV piR-hsa-30937 顺利获得 PTEN/AKT 通路促進巨噬細胞中的 CD276 表達，並且 CD276+ TAM 抑制 T 細胞抗腫瘤免疫。sEV piR-hsa-30937 和 CD276 是 PNEN 免疫治療的潛在治療靶點。

12.Circulating extracellular vesicles as biomarker for diagnosis, prognosis, and monitoring in glioblastoma patients.

循環細胞外囊泡作為膠質母細胞瘤患者診斷、預後和監測的生物標誌物。

[Neuro Oncol] PMID: 38567448

摘要：顺利获得無創液體活檢從患者血液中取得的細胞外囊泡 (EV) 可作為生物標誌物。在這裏，韦德国际研究了循環血漿 EV 作為膠質母細胞瘤患者診斷、預後和治療反應指標的潛力。在手術前後多個時間點採集膠質母細胞瘤患者的血漿樣本。顺利获得納米粒子追蹤分析和成像流式細胞術測量 EV 濃度。顺利获得 3D 重建量化腫瘤負荷和水腫。在患有膠質瘤的小鼠中進一步監測 EV 和腫瘤。與健康供體相比，膠質母細胞瘤患者的循環 EV 增加了 5.5 倍（P < .0001）。EV 水平較高的患者的總生存期和無進展生存期明顯短於 EV 水平較低的患者，血漿 EV 濃度是總生存期的獨立預後參數。EV 水平與腫瘤周圍液體衰減反轉恢復高信號的程度相關，但與增強腫瘤的大小無關，小鼠也得到了類似的結果。術後，EV 濃度迅速下降至正常水平，下降幅度與腫瘤切除的程度有關。在病情穩定期間，EV 水平保持較低，但在腫瘤復發時再次升高。在一些患者中，EV 復甦先於磁共振成像可檢測到的腫瘤復發。韦德国际的研究結果表明，血腦屏障的滲漏可能是膠質母細胞瘤患者循環 EV 濃度高的主要原因。升高的 EV 反映了腫瘤的存在，因此對其量化可能對評估疾病活動性很有價值。

今天的整理就到這裏。希望大家可以有所收穫。大家下周見！