本周hzangs在最新文獻中選取了11篇分享給大家，前兩篇文章都是綜述神經元來源細胞外囊泡相關研究技術和研究進展的，第1篇探討了现在腦源性細胞外囊泡的分離方法和標誌物等問題；第2篇文章探討了神經源性細胞外囊泡的研究進展和挑戰；第3篇問題介紹了ß-catenin對腫瘤細胞外囊泡的調控作用；第7篇文章介紹了細胞外囊泡顺利获得調控胰腺癌m5C修飾調控神經重塑；第11篇文章介紹了精液來源細胞外囊泡顺利获得調控Treg分化來介導父系抗原耐受過程。

1.Assessment of brain-derived extracellular vesicle enrichment for blood biomarker analysis in age-related neurodegenerative diseases: An international overview. 

評估腦源性細胞外囊泡富集程度以用於與年齡相關的神經退行性疾病的血液生物標誌物分析：國際概況。

[Alzheimers Dement] PMID: 38864416

摘要：血液中的腦源性細胞外囊泡 (BEV) 可用於微創研究與年齡相關的神經退行性疾病 (NDD) 的中樞神經系統 (CNS) 特異性標誌物。基於聚合物的 EV 和基於免疫沉澱 (IP) 的血液 BEV 富集方案已越來越受歡迎。韦德国际系統地研究了各研究方案的一致性，並確定了與這些方案相關的蛋白質的 CNS 特異性。系統地識別了使用基於聚合物和/或基於 IP 的 BEV 富集方案研究血液中BEV 的 NDD 文章，並比較了這些方案。評估了用於 BEV富集和/或後富集的蛋白質的 CNS 和腦細胞類型特異性、細胞外結構域 (ECD+) 以及在 EV 數據庫中的存在情況。韦德国际發現，共有 82.1% 的研究使用基於聚合物 (ExoQuick) 的 EV 富集，92.3% 的研究使用L1CAM 進行基於 IP 的 BEV 富集。不同研究的離心時間不同。系統鑑定的 82 種蛋白質中，共有 26.8% 是CNS 特異性的：50% 為 ECD+，77.3% 列在 EV 數據庫中。韦德国际確定了需要標準化的協議步驟，並推薦了可用於 BEV 富集或作為 BEV 生物標誌物的其他 CNS 特異性蛋白質。

2.Prospects and challenges in using neuronal extracellular vesicles in biomarker research. 

神經元細胞外囊泡在生物標誌物研究中應用的前景與挑戰。

[Alzheimers Dement] PMID: 39009473

摘要：細胞外囊泡 (EV) 有望成為疾病生物標誌物的來源。EV 的多種分子貨物可能表明其來源組織的狀態，即使在整個血漿的複雜背景下也是如此。现在可用於評估大腦健康生物標誌物的主要工具包括大腦成像和患者腦脊液分析。考慮到這些方法的成本和困難，從血液中分離神經元來源的 EV (NEV) 是一種識別大腦特異性生物標誌物的有吸引力的方法。這一觀點描述了當前基於 EV 和 NEV 的生物標誌物研究的主要挑戰。這些挑戰包括 EV 的豐度相對較低、缺乏經過驗證的分離方法以及難以尋找免疫捕獲 NEV 的適當靶標。韦德国际討論了在 NEV 發揮其生物標誌物研究潛力之前必須解決這些挑戰。

3.Emerging role of oncogenic ß-catenin in exosome biogenesis as a driver of immune escape in hepatocellular carcinoma.

致癌基因ß-catenin在外泌體生物發生中作為肝細胞癌免疫逃逸的驅動因素所發揮的新興作用。

[Elife] PMID: 39008536

摘要：免疫檢查點抑制劑在癌症患者中產生了令人鼓舞的結果。然而，大多數ß-catenin 突變的腫瘤被描述為缺乏免疫浸潤並對免疫療法有抗性。致癌ß-catenin影響免疫監視的機制仍不清楚。在此，韦德国际強調了 ß-catenin 在調節外泌體途徑以及肝細胞癌 (HCC) 中的免疫/癌細胞通訊方面的作用。韦德国际發現，突變的 ß-catenin 抑制了肝癌細胞系和 HCC 患者樣本中外泌體生物合成的兩個主要參與者 SDC4 和 RAB27A 的表達。使用納米粒子跟蹤分析和活細胞成像，韦德国际進一步證明活化的ß-catenin 抑制了外泌體的釋放。然後，韦德国际在 3D 球體模型中證明了ß-catenin 的激活顺利获得外泌體分泌缺陷促進免疫細胞浸潤的減少。綜上所述，韦德国际的研究結果首次證明致癌基因ß-catenin 在外泌體生物合成中起着關鍵作用。韦德国际的研究為ß-catenin 突變對腫瘤微環境重塑的影響给予了新的見解，這可能導致開發增強免疫治療反應的新策略。

4.Aberrant regulation of serine metabolism drives extracellular vesicle release and cancer progression. 

絲氨酸代謝的異常調節會導致細胞外囊泡的釋放和癌症的進展。

[Cell Rep] PMID: 39024098

摘要：癌細胞分泌細胞外囊泡 (EV) 來調節腫瘤微環境中的細胞，使其有利於自身生長並在患者體內存活。儘管新出現的證據已經證明了 EV 釋放的分子機制，但調節癌症特異性 EV 分泌仍然具有挑戰性。在本研究中，韦德国际應用 microRNA 文庫揭示癌細胞分泌 EV 的普遍機制。在這裏，韦德国际確定了 miR-891b 及其直接靶基因磷酸絲氨酸氨基轉移酶 1 (PSAT1)，它顺利获得絲氨酸-神經酰胺合成途徑促進 EV 分泌。抑制PSAT1 會影響多種癌症中 EV 的分泌，這表明miR-891b/PSAT1 軸具有癌細胞分泌 EV 的共同機制。有趣的是，異常的 PSAT1 表達也顺利获得 EV 分泌調節癌症轉移。韦德国际的數據將 PSAT1 控制的 EV 分泌機制與癌症轉移聯繫起來，並展示了該機製作為多種癌症治療靶點的潛力。

5.Boron Neutron Capture Therapy-Derived Extracellular Vesicles via DNA Accumulation Boost Antitumor Dendritic Cell Vaccine Efficacy. 

硼中子俘獲療法衍生的細胞外囊泡顺利获得 DNA 積累增強抗腫瘤樹突狀細胞疫苗功效。

[Adv Sci (Weinh)] PMID: 39021327

摘要：輻射過的腫瘤細胞衍生的細胞外囊泡 (RT-EVs) 包裹着大量來自輻射過腫瘤細胞的 DNA 片段，此外還充當多種腫瘤抗原的整合體。越來越多的證據表明，這些來自受損細胞的 DNA 片段參與下游免疫反應，但它們中的大多數在被納入衍生的 RT-EVs 之前就在細胞中降解了，因此 DNA 片段的低豐度限制了 RT-EVs 的免疫反應。本研究發現，不同的輻射會影響 RT-EVs 中 DNA 片段的命運。硼中子俘獲療法 (BNCT) 顺利获得造成更多的 DNA 斷裂和抗 DNA 氧化核酸酶降解來誘導 RT-EVs (BEVs) 中的 DNA 積累。這歸因於 10B 中子俘獲反應中 α 粒子的高線性能量轉移 (LET) 特性。當 BEVs 被樹突狀細胞 (DC) 內化時，它會激活 DNA 傳感通路，從而導致功能增強，包括抗原呈遞、遷移能力和細胞因子分泌。在接種 BEVs 培養的 DCs (BEV@BMDCs) 後，效應 T 細胞顯著擴增並浸潤到腫瘤中，表明具有強大的抗腫瘤免疫激活作用。BEV@BMDCs 不僅有效抑制原發性腫瘤生長和轉移形成，而且還能引發長期免疫記憶。總之，成功的 DC 疫苗可作為腫瘤疫苗的有希望的候選疫苗。

6.Multimodal smart systems reprogramme macrophages and remove urate to treat gouty arthritis.

多模式智能系統重新編程巨噬細胞並去除尿酸以治療痛風性關節炎。

[Nat Nanotechnol] PMID: 39020102

摘要：痛風性關節炎是一種慢性進行性疾病，其特徵是關節中尿酸水平高，並伴有炎症性免疫微環境。臨床數據表明，單靠尿酸降低療法或抗炎療法往往無法取得令人滿意的效果。韦德国际在此開發了一種智能仿生納米系統，其特點是「外殼」由來自 M2 巨噬細胞和外泌體的融合膜組成，該融合膜包裹着載有尿酸酶、鉑包透明質酸/聚多巴胺納米酶和白藜蘆醇組合的脂質體。該納米系統針對發炎的關節，促進局部抗炎巨噬細胞的積聚，而尿酸酶和納米酶則降低關節內的尿酸水平。此外，定點近紅外輻射顺利获得鉑和聚多巴胺的作用给予局部溫和熱療，啟動熱誘導組織修復。這些成分的聯合使用可以產生協同作用，增強整體效果，從而加快受損關節組織的恢復。

7.Extracellular vesicle-packaged PIAT from cancer-associated fibroblasts drives neural remodeling by mediating m5C modification in pancreatic cancer mouse models. 

來自癌症相關成纖維細胞的細胞外囊泡包裝的 PIAT顺利获得介導胰腺癌小鼠模型中的 m5C 修飾來驅動神經重塑。

[Sci Transl Med] PMID: 39018369

摘要：神經周圍侵襲（PNI）是胰腺癌常見的生物學特徵。儘管PNI在胰腺癌轉移、復發和術後生存率低下中起着關鍵作用，但其機制尚不清楚。臨床樣本分析和內鏡超聲彈性評分表明，癌相關成纖維細胞（CAFs）與PNI的發生密切相關。此外，CAF衍生的細胞外囊泡（EVs）參與了背根神經節共培養和小鼠坐骨神經模型中的PNI。接下來，韦德国际證明CAFs顺利获得PNI相關轉錄本（PIAT）的細胞外囊泡傳輸來促進PNI。機制上，PIAT特異性地結合YBX1並阻斷YBX1-Nedd4l相互作用從而抑制YBX1泛素化和降解。此外，PIAT 以 5-甲基胞嘧啶 (m5C)依賴的方式增強了 YBX1 與 PNI 相關 mRNA 的結合。YBX1 中的m5C 識別基序或下游靶基因中的 m5C 位點的突變可逆轉PIAT 介導的 PNI。與這些結果一致，使用 KPC 小鼠模型的分析表明 PIAT/YBX1 軸顺利获得 m5C 修飾增強了 PNI。臨床數據表明，胰腺癌患者血清 EVs 中 PIAT 的表達與神經侵襲程度和預後有關。韦德国际的研究揭示了腫瘤微環境 (TME) 中 PIAT/YBX1 信號軸在促進腫瘤細胞 PNI 中的重要作用，為精準干擾 TME 中的 CAFs 和 RNA 甲基化以抑制胰腺癌 PNI 给予了新的靶點。

8.HIV-1 Nef is carried on the surface of extracellular vesicles. 

HIV-1 Nef 位於細胞外囊泡的表面。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39016173

摘要：細胞外囊泡 (EV) 是健康和疾病狀態下細胞間通訊的關鍵介質，可將生物活性分子從產生囊泡的細胞運送到受體細胞。在 HIV 感染的情況下，EV 已被證明攜帶病毒蛋白 Nef，這是一種與 HIV 相關併發症有關的關鍵致病因素。儘管人們已經認識到這一點，但 Nef 在囊泡內的具體定位仍然難以捉摸。本研究顺利获得研究含有 Nef 的 EV 來解決這一關鍵的知識空白。總釋放的 Nef 中不到 1% 與 EV 相關；大多數 Nef 以受損細胞釋放的游離蛋白形式存在。儘管如此，EV 相關 Nef 在下調主要膽固醇轉運蛋白 ABCA1（與 Nef 致病作用相關的一個關鍵方面）方面的活性與上清液中存在的游離 Nef 相當。顺利获得一系列生化和顯微鏡分析，韦德国际證明大多數 EV 相關 Nef 分子位於囊泡的外表面。這種獨特的分佈促使人們考慮將含有 Nef 的 EV 作為旨在預防或治療 HIV 相關併發症的免疫治療干預的潛在靶點。總之，韦德国际的研究結果揭示了 Nef 在 EV 內的定位和功能活性，為開發靶向免疫療法以減輕 HIV 相關併發症的影響给予了寶貴的見解。

9.Virus-Mimetic Extracellular-Vesicle Vaccine Boosts Systemic and Mucosal Immunity via Immune Recruitment. 

病毒模擬細胞外囊泡疫苗顺利获得免疫募集增強全身和粘膜免疫。

[ACS Nano] PMID: 39013102

摘要：粘膜疫苗不僅可以抑制感染和防止疾病症狀的开展，還可以防止病毒感染呼吸道粘膜。SARS-CoV-2 刺突受體結合域 (RBD) 是一個引人注目的疫苗靶點，但由於粘膜免疫原性不佳而受到破壞。在這裏，韦德国际報告了一種利用基因工程和樹突狀細胞膜出芽開發的 SARS-CoV-2 模擬細胞外囊泡疫苗。粘膜免疫後，疫苗會迅速募集抗原呈遞細胞，從而引發強烈的先天免疫反應。值得注意的是，它無需使用佐劑，並且可以顺利获得肌肉內和氣管內接種來誘導生髮中心形成。它不僅能引發高水平的 RBD 特異性抗體，還能刺激呼吸道粘膜的廣泛細胞免疫。順序免疫策略，第一时间是肌肉注射，然後是氣管內加強注射，顺利获得高水平的 IgA 和組織駐留記憶 T 細胞反應顯著增強粘膜免疫，從而建立起對假病毒感染的強大防禦。

10.Proteomic profiling of human plasma extracellular vesicles identifies PF4 and C1R as novel biomarker in sarcopenia.

人類血漿細胞外囊泡的蛋白質組學分析表明 PF4 和 C1R 是肌肉減少症的新生物標誌物。

[J Cachexia Sarcopenia Muscle] PMID: 39009419

摘要：肌肉減少症是一種隨着年齡增長而逐漸且普遍的肌肉質量和功能喪失的疾病，由於其患病率高且具有重大的社會經濟影響，是老年人的主要健康問題之一。儘管人們為就肌肉減少症的定義、診斷測試和臨界值達成共識付出了巨大努力，但對於該疾病的非侵入性、特異性和敏感性生物標誌物的需求仍然迫切且尚未得到滿足。細胞外囊泡 (EV) 存在於包括血漿在內的不同生物流體中，其貨物反映了細胞生理學。這項研究分析了肌肉減少症和健壯患者的 EV 蛋白質組，以尋找可用於診斷該疾病的差異蛋白。韦德国际分離了 29 名健壯對照者（年齡 73.4 ± 5.6 歲；11 名男性和 18 名女性）和 49 名 65 歲及以上的肌肉減少症患者（年齡 82.3 ± 5.4 歲；15 名男性和 34 名女性）血漿中的小 EV（sEV），並顺利获得蛋白質組學分析其貨物。使用 ELISA 進一步驗證肌肉減少症和健壯患者之間 sEV 濃度不同的蛋白質。將這些候選物的濃度與 EWGSOP2 肌肉減少症低肌肉強度和低身體機能測試相關聯，並進行受試者工作特徵（ROC）曲線分析以評估它們的診斷能力、敏感性和特異性。韦德国际發現在肌肉減少症和健壯樣本中均鑑定出 157 種 sEVs 蛋白。其中，48種蛋白質從未在 ExoCarta 和 Vesiclepedia數據庫中報道過。統計分析發現，8 種蛋白濃度在組間存在顯著差異：PF4（log2 FC = 4.806）、OIT3（log2 FC = -1.161）、MMRN1（log2 FC = -1.982）、MASP1（log2 FC = -0.627）、C1R（log2 FC = 1.830）、SVEP1（log2 FC = 1.295）、VCAN（FC = 0.937）和SPTB（log2 FC = 1.243）。其中，血小板因子4（PF4）濃度最低，而補體 C1r 亞成分（C1R）在肌少症患者中升高最多，這些結果已顺利获得 ELISA 得到證實（分別為 P = 1.07E-09 和 P = 0.001287）。候選蛋白的濃度與现在使用的 EWGSOP2 測試顯着相關。ROC 曲線分析顯示 PF4 和 C1R 的曲線下面積分別為0.8921 和 0.7476。選擇 PF4 的最優值，靈敏度和特異性分別為 80% 和 85.71%，而 C1R 的最佳截斷值可實現肌肉減少症的診斷，靈敏度和特異性分別為 75% 和 66.67%。韦德国际的研究結果支持將 EV PF4 和 C1R 確定為肌肉減少症的血漿診斷生物標誌物，並為研究這些囊泡內容物在疾病發病機制中的作用打開了大門。

11.Extracellular vesicles from seminal plasma interact with T cells in vitro and drive their differentiation into regulatory T-cells.

精漿中的細胞外囊泡在體外與 T 細胞相互作用並促使其分化為調節性 T 細胞。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39007430

摘要：精漿在女性生殖道內和胎兒發育期間誘導對父系同種異體抗原的免疫耐受性。最近的證據表明精漿中的細胞外囊泡 (spEVs) 發揮了作用。韦德国际從輸精管切除術男性捐贈的精漿中分離出 spEVs，從而排除了睾丸或附睾的任何貢獻。先前的分析表明，這種分離的 spEVs 主要來源於前列腺。在這裏，韦德国际觀察到，當分離的熒光標記 spEVs 與外周血單核細胞混合時，它們主要被單核細胞吞噬，在較小程度上也被 T 細胞吞噬。在混合淋巴細胞反應中，T 細胞增殖被 spEVs 抑制。當分離的 T 細胞被抗 CD3/CD28 塗層珠子激活時，證明了 spEVs 對 T 細胞的直接影響。同樣，spEVs 干擾 T 細胞增殖，以及 CD25 的表達和IFN-γ、TNF 和 IL-2 的釋放。此外，spEVs 刺激 CD4+CD25+CD127-T 細胞表達 Foxp3 和 IL-10，表明分化為調節性 T 細胞 (Tregs)。用蛋白酶 K預先處理 spEVs 可消除其對 T 細胞的影響，表明需要表面暴露的 spEV 蛋白。腺苷 A2A 受體特異性拮抗劑 CPI-444 也降低了 spEVs 對 T 細胞的影響，這與 Tregs 的开展及其免疫抑制功能受腺苷-A2A 受體信號傳導影響的觀點一致。韦德国际發現腺苷在 spEV 中高度富集，並提出 spEV 靶向 T 細胞並被 T 細胞內吞，之後它們可能會將其腺苷含量釋放到內體腔中，從而允許 spEV 靶向 T 細胞中的內體定位A2A 受體信號傳導。總的來說，這些數據支持 spEV 可以直接啟動 T 細胞分化為 Treg 的想法。

今天的整理就到這裏。希望大家可以有所收穫。大家下周見！